Uman Tipi NF-L Antikorları Nörodejenerasyonun Görüntülenmesi İçin Etkili Reaktiflerdir
Son zamanlarda yapılan çalışmalar, nörofilament hafif zincir NF-L için belirli immünolojik analizlerin, çeşitli CNS yaralanması ve hastalık durumlarından etkilenen insan ve hayvanların BOS ve kanındaki bilgilendirici sinyalleri saptadığını göstermektedir. Bu çalışmanın çoğu, sırasıyla 2.1 ve 47.3 olarak da bilinen NF-L, UD1 ve UD2’ye karşı iki fare monoklonal antikoru kullanılarak gerçekleştirilmiştir. Bunlar, Uman Diagnostics NF-Light’ın temel bileşenleridir.™ ELISA kiti, Quanterix Simoa™ boncuk bazlı NF-L tahlili ve diğerleri. Burada antikorların, NF-L “çubuk” Bobin 2 bölgesindeki kısa, korunmuş ve olağandışı bir peptitte komşu epitoplara bağlandığını gösteriyoruz. Ayrıca Uman ve benzeri reaktiflerin şaşırtıcı ve kullanışlı bir özelliğini de açıklıyoruz. Diğer iyi karakterize edilmiş NF-L antikorları, sağlıklı sıçanlardan alınan CNS bölümlerinde sayısız hücre ve işlemin sağlam boyamasını gösterirken, her iki Uman antikoru, muhtemelen kendiliğinden dejenere veya dejenere olmuş nöronların ve bunların işlemlerinin yalnızca küçük bir alt kümesini ortaya çıkarır. Bununla birlikte, sıçan omuriliğinde deneysel orta servikal yaralanmaları takiben, her iki Uman antikoru da doku kesitlerinde çok sayıda profili tanır. Uman pozitif materyal, uygulanan yaralanmadan zarar görmesi beklenen lif yolları ile ilişkilendirildi ve profiller, dejenere ve dejenere süreçler için beklenen şişmiş, boncuklu, süreksiz ve sinüzoidal morfolojiye sahipti. Ayrıca, NF-L’nin C terminal “kuyruk” bölgesine yönelik birkaç antikorun hasar görmemiş aksonal profilleri boyadığını ancak Uman pozitif materyali tanımadığını bulduk. Uman epitoplarının maskelenmesi ve NF-L kuyruk epitoplarının kaybı, sağlıklı hayvanlardan alınan bölümlerin proteazlarla tedavi edilmesiyle taklit edilebilir, bu da keşfettiğimiz immünolojik değişikliklerin nörodejenerasyon kaynaklı proteolizden kaynaklandığını düşündürür. Ayrıca, Uman reaktifleriyle aynı boyama özelliklerine sahip olan Uman epitoplarını içeren NF-L bölgesine yönelik yeni bir monoklonal ve poliklonal antikor reaktifleri paneli oluşturduk. Bunları kullanarak, Uman reaktiflerinin bağlandığı NF-L bölgesinin, iki Uman reaktifi tarafından tanınanlardan farklı olan başka gizli epitoplar içerdiğini gösteriyoruz. Uman tipi epitopların, daha yüksek dereceli nörofilament montajı için önemli olan bir bağlanma bölgesinin parçası olduğunu tahmin ediyoruz. Çalışma, NF-L biyobelirteç özelliklerine ilişkin önemli bilgiler sağlar, Uman tipi ve NF-L kuyruk bağlayıcı antikorların yeni ve kullanışlı özelliklerini tanımlar ve nörofilament düzeneğinin daha iyi anlaşılmasıyla ilgili bir hipotez sağlar.
