CaV1.3 L-tipi kalsiyum kanallarının Shank3 tarafından kümelenmesi

Nöronal L tipi voltaj kapılı Ca kümelenmesi²⁺ Plazma zarındaki kanallar (LTCC), yüksek oranda lokalize Ca2 oluşumunda giderek daha fazla rol oynamaktadır.²⁺ sinyalleşme nanodomainleri. Örneğin, LTCC aktivasyonu, Ca2’yi artırarak nükleer CREB transkripsiyon faktörünün fosforilasyonunu artırabilir.²⁺ kanala yakın bir nanodomain içindeki konsantrasyonlar, toplu Ca gerektirmeden²⁺ sitozol veya çekirdekte artar. Bununla birlikte, LTCC kümelenmesinin moleküler temeli tam olarak anlaşılamamıştır. Postsinaptik yapı iskele proteini Shank3, spesifik olarak ana nöronal LTCC’lerden biri olan Ca ile ilişkilidir._V1.3 kalsiyum kanalıdır ve optimal LTCC’ye bağlı uyarma-transkripsiyon eşleşmesi için gereklidir. Burada Ca’yı birlikte ifade ettik._VHEK hücrelerinde Shank3’lü veya Shank3’süz iki farklı epitop etiketine sahip 1.3 a1 alt birimleri. Hücre lizatlarını kullanan ortak immünopresipitasyon çalışmaları, Shank3’ün birden fazla Ca’yı birleştirebildiğini ortaya çıkardı._VBazal koşullar altında bir komplekste 1.3 α1 alt birimleri. Ayrıca, Ca_V1.3 LTCC kompleks oluşumu Ca tarafından kolaylaştırıldı_VShank3 ile de etkileşime giren β alt birimleri (β3 ve β2a). Ca ile Shank3 etkileşimleri_V1.3 LTCC’ler ve multimerik Ca_V1.3 LTCC kompleks montajı, Ca eklenmesinin ardından bozuldu²⁺ ve kalmodulin (Ca²⁺/CaM) hücre lizatlarına, belki de aktive edilmiş bir Ca içindeki koşulları simüle eder._V1.3 LTCC nano etki alanı. Sağlam HEK293T hücrelerinde, Shank3’ün birlikte ekspresyonu, membrana lokalize Ca2 yoğunluğunu arttırdı._V1.3 LTCC kümeleri bazal koşullar altında, ancak Ca’dan sonra değil²⁺ kanal aktivasyonu. Canlı hücre görüntüleme çalışmaları ayrıca Ca²⁺ Ca’dan Shank3’ü ayrıştıran LTCC’ler aracılığıyla giriş_V1.3 LTCC kümeleri ve Ca’yı azalttı_V1.3 küme yoğunluğu. PDZ alanının Shank3’ten silinmesi, her ikisinin de Ca’ya bağlanmasını engelledi_V1.3 ve multimerik Ca’daki değişiklikler_V1.3 LTCC kompleks montajı in vitro ve HEK293 hücrelerinde. Son olarak, kültürlenmiş sıçan primer hipokampal nöronlarında Shank3 ekspresyonunun shRNA yıkımının, yüzeyde lokalize Ca2 yoğunluğunu azalttığını bulduk._V1.3 Dendritlerdeki LTCC kümeleri. Birlikte ele alındığında, bulgularımız bazal koşullar altında nöronal LTCC kümelenmesine katkıda bulunan yeni bir moleküler mekanizma ortaya koymaktadır.

Yazının devamına buradan ulaşabilirsiniz